J Immunol：CAR-T和TCR-T的现状与挑战

嵌合肝细一维细胞因子（CAR）和T巨噬细一维细胞因子（TCR）词句的T巨噬细一维是当年前长子功能性巨噬细一维治治疗法ACT技术里六大最另行的技术，实现了从坚实分子可微生物学机制学术界到临床学术界免疫治治疗法广泛应用的演变。因其必须表达出新来提炼出细胞因子并能特异功能性识别靶巨噬细一维，CAR-T和TCR-T亦然沦为振奋人心的胃癌治治疗法理论；对于慢功能性感染者及自身免疫功能性功能性疾病，它同样很强广泛的广泛应用年前景。合成微生物学理论，以及分子可微生物学和遗传物质的持续拓展，使得制备特异功能性功能如前所述的人T巨噬细一维沦为也许。在CD19特异功能性CAR-T巨噬细一维应主要用途B巨噬细一维肺癌及淋巴病变的临床学术界次测试里，和幼儿病症均揭示出新持续功能性减缓真实感。不太可能制药工业界的转为，使得工程化T巨噬细一维的广泛应用年前景先次发生了巨大的变动。在此综述里，爱康得生物重写作者Paul Hsu将和大家两人分享国均临床学术界科研工作者对长子免疫治治疗法里已面临的先一和预见机遇的探讨。

现阶段有三种最简单现像T巨噬细一维的长子巨噬细一维治疗法亦然朝着注册审批的方向行进（布1）。抑止功能性淋巴巨噬细一维（TILs）虽拓展缓慢，但数十年来直至持续拓展，不太可能一项针对转移功能性黑色素病变的国际III期随机次测试已经开始。另行近创建的Lion Biotechnologies日本公司亦然商业化广泛应用TILs治治疗法黑色素病变和其他有T巨噬细一维抑止的。

与TILs比起于，研发转等位基因的理论摆脱对特异功能性T巨噬细一维免疫耐受性。这种理论通过转导嵌合肝细一维细胞因子（融合肝细一维结合亦然及T巨噬细一维路径在结构上亦然）或者TCR α/β异二聚体，使T巨噬细一维必须轻另行颇高效的识别靶巨噬细一维。通过施打必须识别特异靶标的等位基因词句T巨噬细一维，赋予免疫都和统亦会以另行的非纯净免疫活功能性。这种理论除了能像巨噬细一维毒素化学治疗和核酸治治疗法快速杀灭均，还避免了疫苗接种和T巨噬细一维起始治疗法的延迟现像。

除了极个别原因均，巨噬细一维治疗法的个功能性化指的是免疫的、源于病症的T巨噬细一维。亦然因如此，长子巨噬细一维治治疗法的研发主要依赖于医学界与制药大标准型企业的密切关都和协力。在这个模式里，医学界与工业界共五存，年前者研发和检验巨噬细一维工程技术的另行思路，后者扩大和实现另行理论在医疗健康信息技术里的声望。这种学界和工业界的协力伙伴关都和已经在世界的许多政府部门里先次出新现，包含哥伦比亚大学与诺华，清太宗医学院与Bluebird Bio、Celgene日本公司，纪念休斯-凯特林胃癌里心、哈钦森弗莱德胃癌学术界里心与Juno Therapeutics日本公司，国立胃癌学术界所与Kite Pharma，西比曼与里国解放军总医院。总体来说是，现在有数十家巨噬细一维治治疗法信息技术的企业总投资额达数十亿美元。

这种协力关都和的声望仍不明确，医学界的学术自由与大标准型企业专注于价值碰面必将造成争执，寻求校均的项目资金支持和知识产权的归属诱因，将沦为创造这个信息技术的学者与谋求获得技术授权的制药日本公司之间激烈意见分歧的话题。

长子巨噬细一维治治疗法在HIV-1和其他慢功能性感染者里的潜在脚色

从历史并不一定来看，早在二十几年年前，就已广泛应用等位基因词句T巨噬细一维对晚期艾滋狂犬病病症顺利进行长子巨噬细一维治治疗法，早期是从于HIV病症的临床学术界次测试结果缺少了现阶段应主要用途长子巨噬细一维治治疗法的以人为本，例如CAR-T巨噬细一维可以在HIV-1/AIDS病症血液只剩十余年。刚开始这些次测试是为了颇高度集中HIV-1感染者的耐药功能性，然而，现阶段该信息技术的先一是研发巨噬细一维治治疗法的潜力，用来清扫暂住的耐受性防狂犬病治治疗法的HIV-1。Gero Hutter等人顺利进行的一项特别的次测试使得该信息技术充满活力，感染者HIV-1的病症，在放弃同种同义造血干巨噬细一维（HIV阴功能性CCR5 Delta32纯合子）GameCube的长子巨噬细一维治治疗法后被医治。有许多理论诱导巨噬细一维造成对HIV-1感染者的内在防功能性，以及通过等位基因词句的长子巨噬细一维施打治疗法来核酸暂住的HIV-1。不太可能学术界证明，最简单特异功能性CD8+CTLs顺利进行长子巨噬细一维治治疗法可以清扫人源化大鼠血液潜在的HIV-1狂犬病，为能用等位基因词句的T巨噬细一维治治疗法HIV-1感染者和其他内源功能性免疫都和统亦会不能颇高度集中的慢功能性感染者缺少了理论坚实。随着构建具备人体免疫都和统亦会大鼠技术的不断提颇高，最简单ACT治治疗法HIV-1感染者的进程将取得极其大的后退。

布1：现阶段巨噬细一维治治疗法的几种途径。通过词句，使亦然常NADP巨噬细一维的同种同义排异反应会失活，同时最简单防的CAR或TCR游击队它；或能用防分子可游击队病症免疫巨噬细一维。在实体里，恶性肿瘤标本最简单来分离TILs并顺利进行增量。大多数原因下，病人在放弃防淋巴巨噬细一维施打年前必只需放弃必要的示例，并须谨慎应治治疗法招致的毒素。

改建工程调节功能性T巨噬细一维

能用调节功能性T巨噬细一维（Treg）依赖性有害的免疫这样的话亦然招致愈加大的兴趣。这一理论的有效功能性已经在自身免疫功能性功能性疾病和同种同义GameCube排斥反应会的临床学术界年前基本概念里取得验证。在大鼠血液长子回输调节功能性T巨噬细一维能可避免致命功能性GameCube物防细胞内病和自身免疫功能性糖尿病。经历同种同义造血干巨噬细一维GameCube的病症，放弃增量的脐带血Treg巨噬细一维已被断定是公共五安全和可行的。学术界部门研发了许多并不相同的巨噬细一维培养理论，以提颇高纯净的和诱导的Treg巨噬细一维的增量和功能。爱康得生物重写作者Paul Hsu认为对并不相同巨噬细一维培养提案的只生产力相异，也许是由于Treg巨噬细一维和现像T巨噬细一维在路径转导方面的相异所致。合成微生物学及生物技术理论已被主要用途Treg巨噬细一维，例如，CAR-Treg在自身免疫功能性疾病的临床学术界年前学术界基本概念里踏入，将CAR应主要用途Treg巨噬细一维的概念集里于通过CAR使Treg巨噬细一维汇聚于易受攻击的组织，用来依赖性那里的自身免疫。能用CAR词句大鼠Treg巨噬细一维核酸髓鞘碱功能性肽特异功能性T巨噬细一维，可以可避免自身免疫功能性脑炎。基于此以人为本，分别寻找结肠和家兔的核酸肝细一维可可避免肠癌和糖尿病。

类似物在ACT广泛应用里的脚色

类似物在巨噬细一维治治疗法研发里起着关键的起着。现阶段学术界者主要最简单两种基本概念：一是同子代大鼠基本概念，最简单大鼠T巨噬细一维和大鼠肝细一维；二是梦魇GameCube病变基本概念，最简单水痘标准型大鼠和人源T巨噬细一维及人源巨噬细一维。在巨噬细一维治治疗法拓展的几十年里，最简单这些基本概念不时亦会得出结论新矛盾和相争执的论据。巨噬细一维治治疗法里大量的可控各种因素是造成这些争执的诱因之一。CAR的在结构上、T巨噬细一维的类标准型包含（CD4/CD8，或2者兼有）、共五刺激分子可的选择、等位基因转导的理论、巨噬细一维人血液增量的时间和理论、细胞内否清髓、类标准型和负重量等都才亦会精准掌控，才能获得精准的论据。比如，在梦魇GameCube病变基本概念里已发掘出新，人血液增量里不最简单CD28刺激益处最简单CD28作为共五刺激路径的CAR。

同子代大鼠基本概念很强原始免疫都和统亦会的优点，而梦魇GameCube基本概念很强必须学术界人类巨噬细一维的优点。一些嵌合肝细一维细胞因子的学术界最简单梦魇GameCube基本概念精准预测其有效功能性。这些都和统亦会未有成功预测到任何毒素，特别是放弃防CD19CAR-T巨噬细一维治治疗法的小儿急功能性淋巴巨噬细一维肺癌（ALL）造成的巨噬STAT释放综合征（CRS）（早先）。尽管同子代大鼠基本概念能预测，但是未曾有模拟CRS，一部分是由于鼠源和人源T巨噬细一维在人血液抑制和增量潜能普遍存在细微而轻要的差别。作为临床学术界次测试显然专注于人源T巨噬细一维，学术界人源T巨噬细一维共五刺激路径的影响变得至关轻要，且为最简单梦魇GameCube病变基本概念缺少支持。更十分复杂的基本概念是最简单人源化大鼠如 MISTRG strain（转等位基因表达出新来人巨噬STAT如的CSF， M-CSF， IL-3， 和促血小板时其的水痘标准型大鼠）为人源巨噬细一维缺少物种特异功能性巨噬STAT的支持，以便减缓替换成的这些巨噬细一维，并也许同时构源巨噬细一维有效功能性和毒素基本概念。其他混合标准型基本概念，如在SCID/beige大鼠里最简单人T巨噬细一维与大鼠单核巨噬细一维都和电磁场，也许亦会缺少更深入的理解。但是，与人源化的大鼠基本概念比起于，从真亦然奏效的同子代大鼠基本概念取得的原始数据更不易让人迷惑。但现阶段梦魇GameCube基本概念所造成的原始数据的针对功能性仍只需增强。因此，同等位基因基本概念和人源化梦魇GameCube基本概念缺少的信息可以表征，同源都和统亦会极其适合在原始的免疫巨噬细一维周边环境下学术界鼠巨噬细一维微生物学，而人源化都和统亦会可允许人体巨噬细一维的替换成和人巨噬细一维与巨噬细一维之间在血液的电磁场。

研发最佳的CAR均观设计

过去的20年里CAR的均观设计已经赢得了电脑科技的进展（布2）。1991年有3个实验室媒体报道了第一代CAR的均观设计。Kuwana等人最先结构了嵌合细胞因子，使T巨噬细一维不依赖于MHC-I类分子可识别靶巨噬细一维。Roberts、Finney和 Lawson 率先结构了带有CD28或4-1BB共五刺激分子可的二代CAR。在临床学术界年前基本概念里，最简单基于CD28的人血液增量经济制度，在梦魇GameCube病变基本概念里 4-1BB比CD28对CAR的功效更有益。两种CAR基本概念都揭示出新临床学术界年前和临床学术界。Long等人的不太可能学术界证明，基于CD28结构的CAR加强并较慢T巨噬细一维脑出新血，而基于4-1BB结构的CAR减缓了T巨噬细一维脑出新血。我们的学术界结果与其论据一致，并且发掘出新CD28内切亦然能传递使现像T巨噬细一维终末分化成的路径。从这些学术界里得出结论新的宋人的论据并不是说是某个人源内切亦然必然比另一个好，而是说是CD28路径是原材料有效的临床学术界T巨噬细一维制品的关键，而4-1BB增强了CAR-T巨噬细一维的持久功能性。

布2：CAR-T巨噬细一维的均观设计。第一代CAR引入了CD3ζ末端或十分相似的路径亦然。基于血清先定向的T巨噬细一维首先由Kuwana均观设计并由Eshhar充实。Roberts和Finney首先均观设计了拆分CD28或CD137路径亦然的第二代CARs

光影ACT毒素

十多年来，许多ACT临床学术界次测试证明各类工程化的巨噬细一维的产品相当公共五安全，但有效功能性比起忽视。过去的4年里，ACT的先次发生了接连不断革命功能性变动，体现在工程化的T巨噬细一维可以在血液大量增量，甚至在某些原因下可以持续功能性只剩。这彻底的改变了ACT的，尤其体现在CAR-T巨噬细一维应主要用途胃癌治治疗法，但是在揭示出新的同时，显现出新有毒素。

巨噬STAT释放综合征

CAR-T治治疗法造血源最显着的毒素是CRS。颇高度诱导的T巨噬细一维能招致CRS，表现为热气和肌痛，不稳定的低血压和呼吸脑出新血。这是一个难以置信的结果，因为在临床学术界年前类似物里没有先次出新现十分相似疼痛。从CRS注意到里发掘出新一个关键的点，除了意味著的现像巨噬STATINF-γ均，IL-6在CART治治疗法的巨噬细一维指数级诱导期间也亦会迅速增强。CRS也许单独与另一个毒素无关联，即巨噬巨噬细一维增殖综合征。但他却的是，针对这些不堪轻负的CRS，寻找到了一种治治疗法理论，广泛应用IL-6细胞因子拮防剂tocilizumab来阻断IL-6的起着。最简单颇高度诱导的CART治治疗法ALL病症，确认了IL-6的先次出新现和tocilizumab对不堪轻负CRS的，并且我们注意到到了双特异功能性T巨噬细一维延伸血清blinatumomab招致的不堪轻负CRS很强十分相似机制。另一个轻要发掘出新是，不堪轻负的CRS几乎先次发生在颇高功能性疾病负重病人身上。这意味着将CAR应主要用途功能性疾病早期病症身上，在功能性疾病恶化之年前最简单CART来杀灭，先次发生不堪轻负CRS安全性将大大降低。

关于核酸毒素

T巨噬细一维诱导可单独引致CRS。它不依赖于改建工程的T巨噬细一维的肝细一维特异功能性，即使CAR是相同的，治治疗法并不相同的功能性疾病有也许CRS安全性和疼痛也亦会有所并不相同。例如在治治疗法CLL和弥漫大B时CRS较小而治治疗法ALL时CRS比起较小。除了CRS，还普遍存在由工程改建工程的T巨噬细一维的肝细一维特异功能性引致的"核酸"毒素。例如溶病变综合征，它单独是由巨噬细一维的裂解而引致的。当CARs核酸于B巨噬细一维表面亦会表达出新来的途径如CD19时，亦会招致B巨噬细一维畸形，这就是一个"核酸"毒素，但却错误的攻击了亦然常组织巨噬细一维的结果。只要CD19 CAR-T巨噬细一维长久普遍存在，B巨噬细一维畸形的原因就不亦会减缓，因此，B巨噬细一维忽视可作为CAR-T持续的徽章。B巨噬细一维畸形与CD20特异功能性单防治治疗法一样亦会造成不堪轻负的低丙种球肽血症，必只需静脉针头免疫球肽。不像CD20 单防 rituximab招致的比起较小的低丙种球肽血症，CAR招致的长期B巨噬细一维畸形，静脉针头免疫球肽极其必要。不太可能报告了施打改建工程的T巨噬细一维招致致命毒素的2个范例，有一例病症放弃了HER2-CAR治治疗法，两例病症放弃了核酸MAGE-A3的TCR-T巨噬细一维治治疗法。在这2个范例里，均是因为亦然常组织表达出新来这些途径，引致急功能性不可逆的心肺毒素。所有的核酸毒素均是由于改建工程的T巨噬细一维不能区别表达出新来核酸肝细一维的亦然常巨噬细一维和巨噬细一维所致。颇高吸引力TCR改建工程的T巨噬细一维招致的毒素也许与吸引力成熟期处理事件过程有关，因为"非核酸"的颇高吸引力TCR的造成在表征必只需下将受到受限。在均观设计TCR的处理事件过程里，不慎筛选颇高吸引力的TCRs，并学术界其对靶肽之均的其他肝细一维表位的识别显得十分必要。根据已有媒体报道，施打HLA-A2/MAGE-A3特异功能性的TCR-T巨噬细一维必须造成脑毒素。

脑毒素

CAR-T治治疗法肺癌亦会招致脑都和统亦会疼痛，这是一个意味著之均且现阶段尚不清楚的现象。几个学术界调查小组媒体报道，这些疼痛很强多样功能性但可自行升颇高，如谵妄、语言障碍、运动障碍、缄默症和癫痫头痛。虽然与脸部CRS的先次发生有些时间上的关联，当然也与CAR-T普遍存在于脑脊液里无关，但是最简单tocilizumab这些疼痛不亦会有改变。这些疼痛的机制与靶组织仍有待确认。

其他毒素

施打增殖的T巨噬细一维普遍存在招致自身免疫功能性功能性疾病的安全性。核酸黑色素病变的ACT治治疗法可抑止白癜风。施打增殖的T巨噬细一维造成如瘙痒、肠癌、下丘脑炎等毒素的媒体报道较少。CAR词句的T巨噬细一维未曾先次出新现这些诱因。施打同种同义T巨噬细一维普遍存在防细胞内GameCube病的潜在安全性。这也许亦会招致曾放弃同种同义造血干巨噬细一维GameCube的病症的激怒。但他却的是，从细胞因子采集已耐受性NADP是从的T巨噬细一维（而不是捐**），防GameCube物细胞内病的安全性亦会极其低。当然有一种理论是能用上吊都和统亦会来受限毒素，如经典的caspase-9 诱导表达出新来都和统亦会，或包含特定表面亦会途径如CD20。在带有caspase-9诱导都和统亦会下，一种水溶功能性增殖剂可抑制Caspase都和统亦会引致T巨噬细一维增生。包含CD20等位基因词句的CAR-T巨噬细一维，最简单单防如rituximab来清扫"违规"的巨噬细一维。

该信息技术面临的诱因

不太可能实验室学术界亦然在解决在科学与工程方面遇到许多先一。示例我们谈一谈当年前面临的先一。

巨噬细一维制品的包含

早期的巨噬细一维治治疗法主要是施打颇高分化成的CD8+T巨噬细一维。这些CTL巨噬细一维很强很强的巨噬细一维毒素，但是施打后没有足够的复制潜能，除了个别原因均，流入病症血液的T巨噬细一保持良好久功能性较差。现阶段普遍同时施打CD4+与CD8+T巨噬细一维，很也许是因为CD4+T巨噬细一维缺少生长因子和其他路径以保持良好施打的CTL的功能和活功能性。另均，在大鼠里的学术界有时候亦会误解处理事件人源T巨噬细一维的理论。例如，由于受到多肽末端退化的影响，人源T巨噬细一维的复制潜能有限，在大鼠基本概念里却没有这个特点，而人CD4+巨噬细一维比大鼠CD4+巨噬细一维很强更强的巨噬细一维毒素。现在的诱因是否必只需能用流式巨噬细一维术或其他的理论分离巨噬细一维亚群并顺利进行独立培养。CD4+和CD8+T巨噬细一维最佳巨噬细一维培养必只需并不相同，这因为CD4 +和CD8 + T巨噬细一维路径转导途径不一样。此均，巨噬细一维分离法可替换成对现像T巨噬细一维治疗法普遍存在潜在造成危害的Treg巨噬细一维。况且，必只需从施打的T巨噬细一维里替换成巨噬细一维，对肺癌病症而言，这尤其很强先一功能性。然而，在GMP原材料里有些技术使巨噬细一维制备开销大大增加，如通过流式巨噬细一维术或磁珠分选巨噬细一维可使开销迅速增加10000美元甚至更多。

年龄诱因

与上述诱因无关，施打处于什么分化成阶段的T巨噬细一维最佳？对大鼠和人类的学术界结果证明，naive或里心知觉巨噬细一维是比较好的。对只有少量naive T巨噬细一维的老年人而言，如何获取这类巨噬细一维是个先一，且化学治疗或其他功能性疾病通常亦会进一步放大难度。从我们最简单CD19 特异功能性CAR-T治治疗法肺癌病症的原始数据里证明，增量潜能是预测成功的最轻要的微生物学徽章。一种理论是在全血淋巴巨噬细一维里分离里心知觉或naive T巨噬细一维。与此相反，一个更有高效率粗放的理论是最简单大量T巨噬细一维在特定培养必只需下保持良好naive或里心标准型知觉巨噬细一维的增量。后一种理论基于特异功能性共五刺激路径可以无可避免巨噬细一维定向分化成的理论。如CD28的刺激可使CD4巨噬细一维保持良好里心知觉巨噬细一维状态，4-1BB可以无可避免CD8里心知觉巨噬细一维的诱导。相反ICOS共五刺激分子可可以无可避免和稳定Th17巨噬细一维的生长。能用T巨噬细一维的干巨噬细一维样特功能性是极其有希望的，Wnt路径通路的抑制可以作出新贡献知觉干巨噬细一维的诱导。

否普遍存在统一的最佳巨噬细一维制品？抑或针对并不相同的必只需并不相同的？

CD19 CAR-T治治疗法B巨噬细一维恶功能性揭示出新的前所未见且难以置信的能否先次出新现在治治疗法实体病变病症身上还未可知。我们发掘出新CAR-T在人血液杀灭低分化成腺癌巨噬细一维的高效率十分相似于肺癌。然而，仍然有待进一步确定否必只需变更巨噬细一维组成类标准型或巨噬细一维培养必只需，用来优化实体病变病症血液改建工程的T巨噬细一维的发运和持久功能性。与恶功能性血液功能性疾病的凝在分布并不相同，最简单巨噬细一维工程的理论优化T巨噬细一维向实体病变块发运，如成囊状巨噬细一维病变和胰腺癌，也许亦会有所并不相同。已提议一种理论是能用核酸意图，如最简单遗传物质的伎俩，最简单各种细胞因子或细胞因子细胞因子无可避免T巨噬细一维向手部富集。其他理论包含对或病症顺利进行示例，如顺利进行放疗，针头溶病变载体以及在病变内单独针头T巨噬细一维。

最优化的共五抑制在结构上亦然在CD4+和CD8+ T巨噬细一维内是一样的吗？

同样学术界证明并不相同亚群的T巨噬细一维培养必只需是并不相同的。这就提议一个诱因，并不相同淋巴巨噬细一维亚群的T巨噬细一维否必只需并不相同的路径分子可顺利进行游击队呢？为着手解决这个诱因我们对CD4+和CD8+T巨噬细一维一维内区CD28， 4-1BB和ICOS顺利进行了安全性评估。在梦魇GameCube腺癌的人源化大鼠里，我们发掘出新最简单ICOS路径亦然的CD4+ CAR-T巨噬细一维更为极为轻要，而CD8+T巨噬细一维常优选4-1BB。如此增加巨噬细一维制备的十分复杂度否能使临床学术界实验受益应属待进一步确定。此均，最佳的T巨噬细一维亚群%和路径分子可的结构在并不相同的微周边环境里很也许亦会有相异。比如在一些临床学术界年前基本概念里改建工程的Th17巨噬细一维比Th1巨噬细一维更极为轻要。

共存与毁掉：上吊在结构上能否逼近非核酸招致的毒素？

最简单改建工程的T巨噬细一维最大的假设是能用生物合成技术诱导的另行的、增强的巨噬细一维现像否亦会招致意均的脱靶毒素。CAR-T巨噬细一维的非核酸毒素和TCR巨噬细一维的脱靶毒素被甚为注目。有多种理论可以减缓这些诱因。我们发掘出新能用编码CAR的mRNA转染T巨噬细一维，受限CAR非常少在转染T巨噬细一维里表达出新来，对安全性评估先次出新现的单独毒素有帮助。当先次出新现毒素反应会，终止巨噬细一维施打，毒素亦会迅速逼近。学术界部门也提议了许多诱导等位基因词句T巨噬细一维增生的理论。这些理论很也许都亦会被拆分，以便按只需清扫T巨噬细一维，做到严格的公共五安全只生产力。

论据

基于亦然在顺利进行的次测试，表达出新来CARs和TCRs的T巨噬细一维已经为广泛的商业广泛应用准备就绪。华尔街的森林资源亦然倡导这个曾因投资不足而被受限的信息技术的持续拓展。在施打的T巨噬细一维里引入或删除等位基因，缺少了能摆脱免疫依赖性微周边环境的另行巨噬细一维制品，并且最后也许不必只需最简单免疫起始封闭血清。ACT先进的遗传物质技术的到来，才亦会使能用合成微生物学理论顺利进行胃癌、慢功能性感染者和自身免疫功能性功能性疾病的治治疗法赢得显着进展。

原始出新处：

Barrett DM, Grupp SA, June CH.Chimeric Antigen Receptor- and TCR-Modified T Cells Enter Main Street and Wall Street. J Immunol. 2015 Aug 1;195(3):755-61.